Tesi Online: Valutazione mediante proteomica delle variazioni del microbiota orale in seguito a trattamento professionale

Presentazione

Il microbiota è la totalità dei microrganismi (batteri, virus, funghi, protozoi) che vivono colonizzando un’ambiente specifico. Si ricorda che il microbiota orale umano è la comunità ecologica dove risiedono più di 700 microrganismi che vivono in armonia. Dai diversi studi presenti in letteratura si è evidenziata la correlazione di un certo microbiota orale, con lo sviluppo di certe patologie, che non riguardano il cavo orale (carie, malattie parodontale), ma anche malattie a livello sistemico e immunitario (patologie cardiovascolari, diabete, artrite reumatoide).

In questa ricerca si valuta l’efficacia di tre trattamenti professionali (laser al diodo, acqua ozonizzata e clorexidina 0,20%) di diversa azione su una coltura di batteri cariogeni dell’essere umano, osservandone i potenziali effetti antimicrobici.

Per il seguente studio sono stati preparati 96 dischetti di dentina bovina conservati in una soluzione al 50%. I trattamenti proposti sono stati: laser a diodi, acqua ozonizzata e clorexidina al 0,20%. Inoltre, sono stati preparati dei campioni di placca orale, collezionati da 3 volontari sani, previo consenso informato. Dopo la raccolta della placca sono stati mantenuti in un terreno di coltura per 24 h, in una cappa anaerobica. La placca è stata congelata a -80°C per preservare lo stato iniziale, e poi scongelata prima dell’esecuzione dei vari test, e mantenuta ad una temperatura di 37°C. I dischetti di dentina sono stati contaminati con la sospensione batterica descritta in precedenza, rimanendo a contatto per 24 h. Successivamente i campioni sono stati esposti ai tre trattamenti: 20 secondi per il laser mentre 30 secondi per l’acqua ozonizzata e la clorexidina 0,20%. A seguire è stata verificata l’attività metabolica dei batteri attraverso Alamar blue. In aggiunta per valutare l’impatto dei tre trattamenti sulle popolazioni microbiche, è stata effettuata la spettrometria di massa sui peptidi ottenuti dalle proteine dei batteri rimasti sulla superficie dentinale e analizzati con “l’Human Oral Microbiome Database V3”.

Osservando i risultati dell’attività metabolica dei batteri, si evidenzia che la clorexidina 0,20% riduce significativamente la vitalità batterica rispetto agli altri due trattamenti. Inoltre, dall’analisi delle popolazioni, delle 41 specie batteriche isolate mediante spettrometria di massa e considerando le popolazioni superiori al 1%, solo 9 risultano idonee all’analisi.

I risultati sullo studio delle popolazioni presenti sulla superficie della dentina raccolti successivamente all’esposizione ai trattamenti descritti, hanno evidenziato che laser a diodo e acqua ozonizzata risultano essere efficaci nella riduzione della Granulicatella adiacens; infatti, dopo l’applicazione di tali trattamenti la popolazione in oggetto si è ridotta di più del 50%. La Granulicatella adiacens è un batterio coccoide Gram positivo, anaerobico facoltativo, spesso presente nella placca dentale, nelle infezioni endodontiche e negli ascessi dentali sebbene sembri spesso presente nella cavità orale.

Dall’analisi delle popolazioni batteriche si è evidenziato una similitudine tra i tre trattamenti proposti, e si è osservato che l’utilizzo del laser a diodo e dell’acqua ozonizzata favorisce lo sviluppo di batteri commensali nel cavo orale.

Buona lettura!